De geschiedenis van de Gasthuissingel gaat terug tot de middeleeuwen. In de 13e eeuw werden grachten gegraven rondom Haarlem als een verdedigingsmechanisme en om de stad van water te voorzien. Een van deze grachten was de Gasthuissingel, die deels diende als waterafvoer en deels als grens van de stad.

Oorspronkelijk stond aan de Gasthuissingel het Sint Jans Gasthuis, een middeleeuws ziekenhuis dat in de loop der eeuwen verschillende functies heeft gehad. Na verloop van tijd werd het gasthuis omgevormd tot een bejaardentehuis en later tot een school. Tegenwoordig is het Sint Jans Gasthuis niet meer aanwezig, maar de naam blijft voortleven in de Gasthuissingel.